九游会(SVIP认证)官方网站-Made in China

本文主要针对高尔基体、溶酶体及神经元细胞，为大家介绍如何选择合适的试剂/探针分别对它们进行染色。

高尔基体的主要功能将内质网合成的蛋白质进行加工、分拣、与运输，然后分门别类地送到细胞特定的部位或分泌到细胞外。高尔基体是完成细胞分泌物（如蛋白）最后加工和包装的场所。

从内质网送来的小泡与高尔基体膜融合，将内含物送入高尔基体腔中，在那里新合成的蛋白质肽链继续完成修饰和包装。高尔基体还合成一些分泌到胞外的多糖和修饰细胞膜的材料。

内质网(ER)和高尔基体主要负责（细胞内脂质和蛋白质的分类），因此，针对这两个细胞器的大部分染色探针都是脂质或是可以影响蛋白质运动的化学物质。在活细胞和固定细胞中，ER和高尔基体的扁平膜囊可以用各种亲脂探针进行染色，然后根据其形态进行区分。

NBD C6-Ceramide是一种荧光鞘脂类似物，可用于研究鞘脂转运和代谢机制。它还可以用于选择性染色活细胞和固定细胞中的高尔基体。环境敏感的NBD染料在水中发出微弱的荧光，但在非质子溶剂和其他非极性环境中荧光增加。

溶酶体（Lysosomes）是动物细胞中重要的细胞器, 其存在的完整性与动物生理病理均密切相关。溶酶体是真核细胞中为单层膜所包围的细胞质结构，内部pH 4～5，含丰富的水解酶，具有细胞内的消化功能。新形成的初级溶酶体经过与多种其他结构反复融合，形成具有多种形态的有膜小泡，并对包裹在其中的分子进行消化。因此，溶酶体具有溶解或消化的功能，为细胞内的消化器官。

含有两类维持结构和功能所必需的蛋白质：执行消化功能的可溶性溶酶体水解酶和具有更复杂功能的溶酶体膜蛋白。

约60种酸性水解酶，包括蛋白酶、脂肪酶、核酸酶，需要由ATP驱动的质子泵与其他离子通道合作来维持酸性环境（pH~4.5）才能发挥作用。

多种溶酶体膜蛋白，例如LAMP1，LAMP2，LIMP2，v-ATPaes和ASM。其中，LAMP1和LAMP2是最丰富的溶酶体膜蛋白，对代谢、生物发生、信号转导和细胞稳态至关重要。

溶酶体的主要作用消化作用，是细胞内的消化器官，细胞自溶，防御以及对某些物质的利用均与溶酶体的消化作用有关。

细胞内消化：对高等动物而言细胞的营养物质主要来源于血液中的水分子物质，而一些大分子物质通过内吞作用进入细胞，如内吞低密脂蛋白获得胆固醇，对一些单细胞真核生物，溶酶体的消化作用就更为重要了。

细胞凋亡：个体发生过程中往往涉及组织或器官的改造或重建，如昆虫和蛙类的变态发育等等。这一过程是在基因控制下实现的，称为程序性细胞死亡，注定要消除的细胞以出芽的形式形成凋亡小体，被巨噬细胞吞噬并消化。

自体吞噬：清除细胞中无用的生物大分子，衰老的细胞器等，如许多生物大分子的半衰期只有几小时至几天，肝细胞中线粒体的平均寿命约 10 天左右。

防御作用：如巨噬细胞可吞入病原体，在溶酶体中将病原体杀死和降解。

参与分泌过程的调节，如将甲状腺球蛋白降解成有活性的甲状腺素。

形成精子的顶体：顶体相当于一个化学钻，可溶穿卵子的皮层，使精子进入卵子。

FluoLysoTM 探针是一种用于活细胞溶酶体特异性标记的荧光探针，本品浓度为 1 mM。FluoLysoTM 探针可以选择性地滞留在偏酸性的溶酶体中，从而实现对于溶酶体的特异性荧光标记。FluoLysoTM 探针适用于活细胞染色，但不适合用于固定后细胞的染色。

神经元，也称为neurone或神经细胞，是一种可电兴奋的细胞，通过称为突触的特殊连接与其他细胞通信。它是神经组织的主要成分。除海绵和平口类动物之外的所有动物都有神经元，但其他多细胞生物如植物则没有。

感觉神经元对影响感觉器官细胞的触觉，声音或光等刺激作出反应，并向脊髓或大脑发送信号。

运动神经元接收来自大脑和脊髓的信号，以控制从肌肉收缩到腺体输出的一切。

中间神经元将神经元连接到大脑或脊髓的同一区域内的其他神经元。一组连接的神经元被称为神经回路。

突起:分为树突与轴突两部分

树突:较短，分支较多，直接细胞体扩张突出形成树枝状，作用接受其他神经元传来的冲动，并传给细胞体

轴突:较长，每个神经元只有一个轴突，轴突末端有分支，能够传导细胞体发出的神经冲动

髓鞘:轴突的外围，对于神经具有保护作用

细胞体:神经元主要结构，由细胞膜，细胞核，细胞质组成，具有联络，整合、输入信息，传出信息的作用。

神经末梢: 神经纤维末端细小的分支，分布于全身各处

信息的传递方向:树突→细胞体→轴突→下一个神经元

长的突起大都套有一层鞘，组成神经纤维。

信号传输过程部分是电气的，部分是化学的。由于维持其膜上的电压梯度，神经元是可电激发的。如果电压在短时间内变化足够大的量，则神经元产生称为动作电位的全有或全无电化学脉冲。这种潜力沿着轴突快速传播，并在到达它们时激活突触连接。突触信号可以是兴奋性的或抑制性的，增加或降低到达体细胞的净电压。

神经末梢探针是一系列阳离子型苯乙烯基荧光染料，用于跟踪神经肌肉连接或突触的突触活动。这类染料通常具有亲脂性尾部（两个碳链）和带阳离子的高亲水性头部。

阳离子苯乙烯基染料是通过活性依赖性染色突触小泡来发挥功能。染料与细胞或组织共孵育时，染料的水相部分没有荧光，而染料的亲脂性尾部插入细胞膜并呈现强荧光。神经刺激后，在进行胞吞作用时，染料被包裹在囊泡内，因此，洗去细胞表面附着的染料后，荧光信号强弱表示新形成的囊泡的数量的多少。反之，在胞吐作用时，染料与神经递质一起从囊泡释放，导致荧光信号减少。因此，荧光强度的变化反映了胞吞/胞吐或突触活动的情况。内吞过程中荧光增加的速率——“结合速率”和胞吐过程中荧光减少的速率 ——“解离速率”因染料种类而异。通常，具有较长亲脂性尾部和更多双键的染料对膜具有较高的亲和力，因此具有较高的结合速率和较低的解离速率。

NerveRed 系列探针是具有三个双键的染料。

NerveGreen 系列探针是具有单个双键的染料。

NerveGreen C4（FM1-43）是一种广泛使用的绿色荧光染料，通过染色突触的突触囊泡或神经肌肉接头来跟踪突触活动。结合使用红色荧光染料 NerveRed，突触和神经肌肉接头可以独立两个颜色成像。

NerveRed/Green系列探针不能用于固定细胞染色。

NM 染料具有与NerveRed/Green系列探针相似的结构，此外，它们在带正电的头部具有醛固定胺，可用于固定细胞的染色。

Hydroxystilbamidine（也称为FluoroGold）已被广泛用作神经元的逆行示踪剂和组织化学染色剂。FluoroGold可以进行逆行轴突运输，它显示出大量的枝晶填充物，并且具有很高的抗褪色性。